樟芝抑制人類乳癌細胞轉移作用及機制探

中國醫藥大學／營養學系碩士班／97／碩士

研究生:黃依婷

指導教授:楊新玲

轉載 : 臺灣博碩士論文知識加值系統

[ 摘要 ]

樟芝(Antrodia camphorata; AC)為台灣特有的藥用真菌，寄生於牛樟樹上，是常見的傳統中藥，目前對樟芝的研究已顯示具有抗發炎、抗氧化與抗腫瘤等功效。本實驗室已證實從樟芝發酵液獲得的AC-10能抑制MDA-MB-231乳癌細胞的生長，誘導乳癌細胞凋亡，但是AC-10對於抑制MDA-MB-231乳癌細胞轉移的相關機制仍不明確。

癌細胞轉移的過程中通常伴隨著細胞外基質(Extracellular matrix; ECM)的分解，而主要扮演分解ECM的角色為基質金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase；MMPs)，以及促進MMPs活化的尿激酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator ; uPA)。

本研究先以MTT測試細胞存活率，在對於細胞較不具毒殺性且存活率皆大於80%以上的濃度下進行實驗。首先在細胞遷移試驗 (Wound migration assay)與細胞移行試驗 (Transwell invasion assay)方法中顯示，隨著0、20、40、60、80 ug/ml的AC-10濃度，可以抑制乳癌細胞的遷移和移行能力。

另外，由西方墨點法結果顯示AC-10能降低MMP-9、MMP-2、uPA、uPAR與VEGF的蛋白表現，以及MMP-9與uPA的活性。AC-10也增加基質金屬蛋白酶抑制劑TIMP-1、TIMP-2與血漿纖溶酶原激活物抑制物PAI-1的表現。進一步探討訊息傳遞，AC-10可以降低ERK1/2、P38與JNK1/2的磷酸化，結果顯示加了ERK抑制劑UO126與P38抑制劑SB203580可以降低MMP-9表現，若再加上AC-10則能更顯著降低MMP-9的表現，但是在加了JNK抑制劑SP600125與AC-10後，雖然也有降低MMP-9的活性表現的趨勢，但是較不顯著。AC-10亦能降低NF-kB的活性表現，因此，本實驗在觀察細胞遷移與轉移相關蛋白的表現皆顯示AC-10具有降低乳癌細胞轉移的能力，且可能透過抑制ERK1/2、P38與JNK1/2路徑向下調控核內NF-k8表現，並影響MMP-9轉移因子的表現進而抑制乳癌細胞的轉移。