樟芝固態栽培與液態發酵菌絲體之成分及其生物活性之研究

南台科技大學／化學工程系／91／碩士

研究生:范真綺

指導教授:陳啟楨

轉載 : 臺灣博碩士論文知識加值系統

[ 摘要 ]

樟芝（Antrodia camphorata）為台灣特有種之食藥用菇，本研究以A . camphorata菌種所生產之固體栽培及液體發酵培養的菌絲體，經乙醇萃取後其萃取液再經由分配萃取，初步分離為n-Hexane layer、Ethyl acetate(EA) layer、Ethanol(EtOH) layer等三部分，經進一步進行生物活性之分析後，再針對具有活性的部分進行管柱色層層析分離。而經乙醇萃取後之殘渣再以熱水萃取經凍乾得熱水萃取物，經進一步進行透析或酒精沉澱探討其多醣分子量及其生物活性。

樟芝之固體栽培及液體發酵菌絲體乙醇萃取物，對Escherichia coli、 Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis、Staphylococcus aureus subsp. aureus、Pseudomonas aeruginosa、Proteus vulgaris、Pseudomonas glumae、Listeria monocttogenes、Aspergillus niger、Penicillium citrinum、Fusarium moniliforme皆有抑制生長或抑制產孢之能力。固體栽培菌絲體乙醇萃取物對DPPH‧ (1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl)之清除能力遠大於液體發酵菌絲體乙醇萃取物，而不論固體栽培或液體發酵菌絲體乙醇萃取物，其對DPPH‧之清除能力，在反應三十分鐘後(0.4mg/mL)，EA layer效果最佳，EtOH layer次之，n-Hexane layer較差。而固體栽培或液體發菌絲體熱水萃取物(10mg/mL)則以ABTS測定總抗氧化力，以固體栽培菌絲體熱水萃取物較佳。固體栽培菌絲體乙醇萃取液(1mg/mL)，對子宮頸癌(HeLa)、乳癌(MCF-7)、胃癌(AGS)等細胞具有抑制生長之能力，而液體發酵菌絲體乙醇萃取液(1mg/mL)則對乳癌(MCF-7)細胞、胃癌(AGS)細胞有較好的抑制生長能力。在初步分離之三部分(n-Hexane layer、EA layer、EtOH layer)，對抑制癌細胞之生長效果，n-Hexane layer與EA layer較優於EtOH layer。固體栽培與液體發酵之熱水萃取物(5mg/mL)，對於子宮頸癌與胃癌細胞有較佳抑制能力。而固態酒精沉澱物則對子宮頸癌、乳癌、胃癌及肝癌之抑制能力較液體發酵酒精沉澱物佳。

在多醣體成分之測定，不論以透析(透析膜M.W.3000)或酒精沈澱法分析，液態發酵之多醣含量及濃度皆優於固體栽培菌絲體。而經由膠體過濾層析(GPC)分析得知，二者皆有分子量百萬以上之多醣體，且透析後之分子量遠比酒精沈澱的分子量大

綜合本研究之結果，樟芝固體栽培及液體發酵之菌絲體乙醇萃取物和熱水萃取物在抗菌能力、抗氧化能力以及細胞株之抗癌試驗上，皆有良好之效果。